Hibridación in situ en microscopía óptica
Resumo
Las técnicas de hibridación in situ permiten poner de manifiesto, en extensiones celulares o secciones tisulares, secuencias de ácidos nucleicos expresadas por células normales, tumorales o virus.
La idea de este libro nace los cursos de postgrado impartidos bajo los auspicios del programa europeo Leonardo da Vinci y su objetivo es presentar de forma muy didáctica, combinando teoría y práctica, los principios de la hibridación in situ, facilitando la puesta a punto de esta versátil técnica. Se compone de tantos capítulos como etapas tiene la hibridación in situ. Los principios (ilustrados con numerosos esquemas) y los protocolos técnicos se presentan en la columna de la izquierda, y a la derecha aparecen comentarios útiles al respecto. Así, sucesivamente se describen los diferentes tipos de sonda y su marcaje, la preparación de las muestras, los pretratamientos, la etapa de hibridación, el revelado de los híbridos, las contratinciones y modos de observación, los controles a realizar y los problemas que pueden surgir. Para facilitar la labor de los que se inicien en la técnica, en la última parte del libro se describen pormenorizadamente una serie de protocolos técnicos muy estandarizados y se incluyen unos anexos en los que se presenta la preparación de todos los reactivos necesarios y unas láminas de resultados.
Todos estos elementos hacen de este libro un manual iimprescindible en la mesa de laboratorio tanto de los investigadores que ya conocen la técnica de hibridación in situ, pero que pueden descubrir en él nuevas posiblidades, como de los que deseen ponerla a punto.